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1. TTC法实验的优缺点
TTC染色
1原理：
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TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复TTC染色合物，1894年首次合成用来检测种子的生存能力，1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。2取脑：可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。因为脑组织未用多聚甲醛固定，所以较软，取脑时更应仔细，保持大脑的完整性。
3－20度冰箱中速冻20分钟左右，便于切片。
4切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处；第二刀在视交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。（参考：张均田，主编.现代药理试验方法）。如果需计算面积的话，应切的均匀或用专门的脑槽。
5降切片置于TTC中，常规浓度为2％，也有用1％或更低浓度的。
6用锡箔纸盖住后，放入37c温箱15～30min，不时翻动脑片，使均匀接触到染色液。 7染色后效果：为皮层下梗死。
2. ttc法检查抗生素的优缺点
作为原料乳的生鲜牛乳，国家标准从感官、理化及微生物指标方面已有了明确的规定，具体要求为：
（1）生鲜牛乳系由正常饲养的健康母牛挤出的新鲜乳。初乳和末乳不得作为原料乳使用。奶温在10℃以下。
（2）具有纯正的鲜奶所固有的清香味和滋味，不得有酸臭味、苦味臭味、霉味、金属味等。
（3）外观呈乳白色或微黄色的均匀胶体状，呈浓厚劲稠、絮状凝块乳不得使用。
（4）不得有肉眼能见的草屑、牛粪、尘土等杂质，无沉淀物出现。
（5）酸度不超过20°T。
（6）乳的相对密度为1.028～1.032，含脂率不得低于3%，无脂乳固体物不低于8%。
（7）不得使用防腐剂、抗生素和其他任何有碍食品卫生的物质。
（8）乳的密度 正常乳的密度是乳中各种成分密度的平均值，当乳中比水重的无脂干物质增多时乳的密度会增高，加水时密度则降低。乳的密度通常用乳汁密度计测定。表示方法以度数（°F）来表示，正常乳为30度。每加10%的水约降低3度。乳的密度随温度而变化。在10～25℃范围内，温度每增加或减少1℃，密度则减少或增大0.2度。因此，当乳温达到20℃后，每提高1℃，相对密度值应加0.2度，反之应减去0.2度。
（9）乳的酸度 由于牛乳含有蛋白质、柠檬酸盐、磷酸盐、脂肪酸、二氧化碳等酸性物质，因此牛乳呈微酸性，其pH为6.5～6.7，这种酸度称为自然酸度。由于微生物的活动，乳糖被分解产生乳酸，使牛乳的酸度升高。这种因发酵而升高的酸度称为发酵酸度。自然酸度和发酵酸度的总和称为总酸度。乳的总酸度越高，乳的热稳定性越低，生产出乳制品的质量也会降低。牛乳的酸度通常用吉尔涅尔度表示，正常乳为16～18°T。其测定方法一般是用0.1摩尔氢氧化钠滴定10毫升乳品，用0.5%酚酞为指示剂，当被滴定样品呈微红色时所消耗的氢氧化钠的体积数乘以10即为100毫升乳的酸度。
（10）酒精试验 酒精试验是验收原料乳的重要项目。一定数量的正常乳对一定浓度及数量的酒精的脱水作用呈现稳定性。但乳的酸度升高时，乳酪蛋白质因酒精的脱水作用而产生凝集作用。一般用68%～70%的酒精与等量的牛乳相混合，若呈现稳定者，说明牛乳的蛋白质稳定，牛乳的酸度符合原料乳的要求。牛乳对酒精的稳定性越高，牛乳的热稳定性也越好。此外，酒精试验还可以检出乳房炎乳、盐类不平衡及混入钙等异常乳。
（11）热稳定性试验（煮沸试验） 煮沸试验能有效地检出高酸度乳和混有高酸度的乳。将牛乳（取5～10毫升乳于试管中）置于沸水中或酒精灯上加热5分钟，如果加热煮沸时有絮状或凝固现象发生，则表示乳已不是新鲜的，酸度在20°T以上，或混有高酸度乳、初乳等。
（12）乳中抗菌物质的检验 乳中有无抗菌物质，常用氯化2，3，5-三苯基四氮唑法检验（TTC法）。将检样（9毫升）（以不含抗菌物质的脱脂乳为对照）置于80℃恒温水浴中保持5分钟杀菌，然后冷却至37℃。向试管中加入试验用稀释菌液（嗜热链球菌）1毫升，充分混合后于37℃的条件下培养2小时，然后各加入0.3毫升TTC试剂，继续培养5分钟，如果样品液与对照液一样出现红或桃红色，说明无抗菌物质存在；若为无色，说明有抗菌物质存在。
（13）细菌总数 每毫升不超过50万～100万个。一般直接、快速的测定方法为直接计数法。
步骤为：
①测直径在显微镜下用测微尺测出油镜视野的直径（r）。
②涂片载玻片上用玻璃刀或用蜡笔划1厘米2的方格，用微量吸样器吸样并将之滴到载片的方格中，用接种针将样品涂匀，然后在酒精灯火焰上干燥（40～50℃）。③脱脂干燥后将玻片置于二甲苯中脱脂1～2分钟，取出沥净晾干，再浸入95%酒精1～2分钟，除去二甲苯。④染色用美蓝染色5分钟，水洗、干燥。然后镜检10～15个视野，计所见细菌数。
（14）黄曲霉毒素M1 不得超过0.5微克／千克。原料乳中黄曲霉毒素M1测定可采用免疫亲和层析净化液相色谱、免疫层析净化荧光分光度法和双流向酶联免疫法，一般大型乳品厂都有测定设备。
3. TTC是什么实验
氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲瓒，生成的三苯甲瓒比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中
脱氢酶
所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。
TTC溶液配制：取3g TTC溶于1L蒸馏水或冷开水配制成0?1％TTC溶液药液PH应6?5～7?5PH试纸试之(易溶解先加少量酒精使其溶解再加水)
4. TTC试验
优点：TTC（2，3，5－三苯基氯化四氮唑）的氧化态是无色的，可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替（TTF）。
缺点：如果没有抗生素存在，则加入的试验菌即行增殖，TTC还原变成红色，试样也随之染成红色。也就是说试样呈奶的原色时为阳性，染成红色时阴性。
5. 用ttc法进行检测主要用于哪些方面
是的。目标检测：检测前方车辆识别目标车辆计算与目标车辆的碰撞时间TTC检测距离>120 m)性能指标：检测速度：30帧/秒准确率: > 95%误报率:
6. TTC染色法的优点与不足
2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又称四唑红，简称TTC，TTZ，或TPTZ，一种脂溶性光敏感复合物，即可用来检测种子的生存能力，也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂，活细胞内的脱氢酶（尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶）可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。对于种子或者植物组织来说，染色结果为活组织被染成不同程度的红色，死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织，因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色，而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%（w/v），也可根据组织类型做浓度的适当调整。
7. 加入TTC是否影响实验结果
蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠能维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；大多数细菌能还原TTC，使之形成易于辨别的红色菌落，TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。
操作步骤：
使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
1、制备质控菌液。
2、选择合适稀释度的目标菌质控菌液1ml，接种到两个无菌平皿中，将10ml-15ml冷至45-50℃的TTC营养琼脂倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培养基和目标菌质控菌液充分混匀。待琼脂凝固后，再加入3ml-4ml的TTC营养琼脂覆盖平板表层，以TSA为参比培养基。
3、36±1℃倒置培养基培养48±2小时，记录实验结果。
8. TTC法的优缺点
TTC法，BTB法，红墨水染色法
9. ttc法ph的重要性
TTC法，为目前国际上公认的较好的测定种子生活力的方法，其原理为氧化态的无色的氯化三苯基四氮唑接受了活种子呼吸过程中脱氢酶产生的氢，而变成红色的还原态物质。
有生活力的种子其脱氢酶的活性往往高，四唑接受氢离子还原为红色，而死组织不着色，故根据染色部位及染色深浅可以判断种子的生活力。
红四氮唑为白色或淡黄色的有毒粉末，宜放在暗处低温下保存。
用蒸馏水配成0.1%～1%浓度的溶液，用稀碱调pH至中性（如用0.05～0.1摩尔/升，pH7.5的磷酸缓冲液配制，调pH至6.8～7.2，效果更好）。
用棕色瓶放冰箱中保存备用。供试种子先浸泡16～24小时，然后沿种脊小心地将种子切成两瓣，放烧杯或培养皿内，切面朝下，滴入四唑溶液浸没剖面，放25～30C温箱内经8～24小时后取出冲洗净，观察染色反应，温度越高，染色越快。
如放在室温下需遮光，因四唑溶液对光敏感。
有生活力的种子胚染成红色，无生活力种子则不染色或仅有浅红斑点。
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