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种子培养基和发酵培养基区别,糖发酵培养基是半固体培养基吗

2023-12-24 22:491770

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1. 糖酵解培养基

醋酸发酵为氧化发酵之一。是指乙醇在醋酸菌的作用下氧化成醋酸的过程。此外还有多种微生物通过厌氧活动亦可将各种化合物形成醋酸,但对此一般都不称其为醋酸发酵。

醋酸菌

醋酸菌(Acetobacter)革兰阴性,细胞椭圆、杆状、单生、成对或链状,在老培养液中易出现畸形体,具周生鞭毛或无。能氧化乙醇为醋酸,氧化葡萄糖为葡萄糖酸。能利用醋酸盐及乳酸盐使其氧化为CO2,不能利用乳糖、糊精及淀粉等。葡萄糖酸杆菌(Gluco-nobacter)具端生鞭毛,能氧化乙醇为醋酸、葡萄糖为葡萄糖酸,但不能使醋酸盐及乳酸盐氧化为CO2。中国常用的中科1.41及沪酿1.01菌株均为醋酸杆菌属细菌。

醋酸发酵的主要机理如下。

1.从乙醇氧化为醋酸

这一步可分为以下两个阶段:

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(1)先由乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化成乙醛,

(2)乙醛通过吸水形成水化乙醛,接着由乙醛脱氢酶氧化成醋酸,

综合上式,整个反应式为:

CHCHOH+O一CHCOOH+HO

理论上,1009酒精能生成纯醋酸130.49,但在实际生产过程中,却只能生成100g醋酸。

2.己糖一磷酸途径

木醋杆菌能通过己糖一磷酸途径,利用糖生成醋酸。

己糖磷酸途径生成的5-磷酸一核酮糖在5-磷酸解酮酶的作用下,裂解为3-磷酸甘油醛和乙酰磷酸,其中乙酰磷酸在乙酸激酶的催化下转变为醋酸,而3-磷酸甘油醛通过糖酵解途径变成丙酮酸,然后还原成乳酸。

3.醋酸菌的过氧化反应

由于醋酸菌可产生乙酰辅酶A合成酶,因此它能氧化醋酸为二氧化碳和水。

所以,在食醋生产过程中发现酸度不再上升,酒精氧化将完时,就要加入食盐,抑制醋酸菌的繁殖与发酵,以防醋酸分解。

4.其他反应

醋酸发酵过程中,主要利用的是醋酸菌所具有的氧化酒精生成醋酸的能力。此外,弱氧化醋酸菌能将D葡萄糖氧化成葡萄糖酸、D5酮基葡萄糖酸,再经还原生成D酒石酸。弱氧化醋酸菌、胶醋酸杆菌、纹膜醋酸杆菌可将酵母菌利用糖分生成的甘油氧化成二羟基丙酮。

此外,原料中少量的脂肪成分,在霉菌所产生的解脂酶的作用下,可生成各种脂肪酸和甘油,这些脂肪酸和醇又可反应生成不同的酯类;原料中的蛋白质经蛋白酶水解成各种氨基酸,如果食醋中含有多种酯类和氨基酸,口味就更加浓醇,也增加了醋酸的香味。

条件

醋酸菌为好气性菌,发酵在通气条件下进行,发酵温度一般为25~30℃,醋酸菌需要氨基酸及维生素类物质,因此发酵液中除乙醇外还需添加酵母汁、曲汁或其它含氮有机质。

方式

醋的酿造有固体发酵和液体发酵两种方式。如以淀粉物质为原料需先进行糖化及酒精发酵,最后进行醋酸发酵,固体发酵为传统工艺,参与微生物种类较多,产品风味较好。液体发酵一般为工业化生产,用纯培养菌种,产量多、成本低,但产品风味较差。

2. 糖发酵培养基是什么培养基

GN增菌液(简称GN肉汤,Gram Negative Bacteria Broth,即革兰氏阴性菌肉汤)用于革兰氏阴性菌的选择性培养,特别是志贺氏菌和沙门氏菌的增菌培养。

该培养基中胰蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖和甘露醇提供糖类;柠檬酸钠和去氧胆酸钠抑制革兰氏阳性细菌,特别是粪链球菌和各种需氧及厌氧芽孢杆菌,但由于去氧胆酸钠浓度低,对大肠菌的抑制力较弱,不影响沙门氏菌和志贺氏菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂,可缓冲因标本或细菌发酵糖的酸化作用,可使培养基PH稳定;氯化钠维持均衡的渗透压;甘露醇比葡萄糖量多,这对变形杆菌的生长有所限制,而对沙门氏菌和志贺氏菌却很有利,因为后两者都能利用甘露醇。所以说GN增菌培养基是为从含有超量杂菌的标本中分离沙门氏菌或志贺氏菌而设计的。

3. 糖酵解培养基配方

dmem培养基不可以高温

温度变化会影响PH,而且对里面的抗生素有很大影响,细胞都有恒定的最适温度,高温的话细胞恐怕会逐渐凋亡

DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;3)含有糖酵解途径中的重要物质--丙酮酸;(4)含有微量的铁离子

4. 糖酵解培养基的制备实验报告

EMP培养基是一种选择培养基

EMP途径:EMP途径又称糖酵解途径或己糖二磷酸途径,是绝大多数微生物所共有的一条主流代谢途径。它以1分子葡萄糖为底物,约经10步反应,可产生2分子丙酮酸、2分子NADH2和2分子ATP。

5. 单糖发酵培养基

PS琼脂实验方法特点:

(1)MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适,可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。

(2)B5培养基 是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜,如双子叶植物特别是木本植物。

(3)White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度和增加了鹏素。其特点是无机盐数量较低,适于生根培养。

(4)N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。

(5)KM-80培养基 它是1974年为原生质体培养而设计的。其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合的培养。

按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类:

(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。

(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。

(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。

6. 糖酵解培养基的制备

大肠杆茵糖酵解实验现象:能分解乳糖和葡萄糖,而沙门氏茵只能分解葡萄糖,不能分解乳糖。

大肠杆菌有甲酸解氢酶,能将分解糖所生成的甲酸进一步分解成二氧化碳和氢气.故产酸又产气,而沙门氏茵无甲酸解氢酶,分解葡萄糖仅产酸而不产气。在进行大肠茵群测定时,就是根据这一原理而采用乳糖发酵试验。

当大肠茵群分解乳糖而产酸时,可使培养基内的溴甲酚紫指示剂由蓝色变成黄色,产生的气体可在倒置的小管内观察。

7. 糖酵解培养基是什么

293T细胞培养基中,需要加入丙酮酸钠丙酮酸钠是糖酵解观察中的中间产物,可以直接进出细胞。添加到培养液中即为细胞提供能量,又是合成代谢所需的碳源。

有些类型的细胞需要添加丙酮酸钠,降低血清浓度时也可添加,进行克隆培养时可添加。丙酮酸钠还有助于降低荧光物质引发的光毒作用。丙酮酸钠使用浓度通常是0.1mm,lomm(l00x)丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠.

8. 糖发酵培养基各成分的作用

1、母种的制作

  生产上用的母种,不管是从外地引进的,还是自己分离的菌种,对母种的转接一般应控制在三代以内,且菌龄要适宜。优质母种的特征:菌丝洁白、浓密、粗壮、生长整齐,不产生色素,气生菌丝少,有菇香味。

  1.1 母种培养基配方 马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂ZO克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁0.50克,水1000毫升 PH值5.50~6.50。

  1.2 培养基的制备 选择未发芽、无病害、不发青的新鲜马铃薯洗净去皮,称取200克,切成小块,装入烧杯(量杯)中,倒入清水1000毫升,加热煮沸维持20~30分钟,至马铃薯酥而不烂为度,加热过程中稍加搅拌,然后用3层纱布过滤,取其滤液,补水至1000毫升,在马铃薯汁液中加入琼脂,继续加热搅拌至琼脂完全溶化,最后加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁,加水补至10 0 0毫升,用"PH"试纸测定并调节"PH"值。在正常操作的情况下"PH"值常在要求范围内,常可忽略测定。分装在试管中,高度为试管高度的1/8~1/5,加棉塞,包扎,放在高压锅内灭菌,指针指到 0.0 4 M PA时排放冷空气,再升压到0.10 5 M pA维持 3 0分钟,自然降温到60℃左右出锅,摆成斜面。

  1.3 接种培养 按常规法接种后将母种放入培养室内,温度23~25℃,空气相对湿度 65%左右培养 7~10天,菌丝长满培养基斜面,即可用来接原种。

  2、原种的制作

  制种原料的选择和配制对菌种生产的质量和使用效果有着直接的关系,常用的原料有小麦(玉米X棉籽壳等。

  2.1 原种配方

  2.1.1,小麦(玉米)95%、石膏粉2O% 过磷酸钙 2O% 尿素 0.50%、白糖 0.50%、pH值 5.50~6.50。

  2.1.2 棉籽壳 87%、麸皮 10%、蔗糖白糖)0.50%、石膏粉 1%、过磷酸钙 1%、尿素 0.5 0%、加水120%~ 130%。

  2.2 培养基的制备

  2.2.1 将JJ、麦(玉米)筛检干净,称量,置清水中浸泡2小时,再放入开水中边煮边搅动,随时检查煮的程度,特别是煮到15分钟后更要勤检查,待麦粒(玉米)无白心,熟而不烂(不能开花)时立即捞出,放在尼龙布或干净的水泥地上晾晒。见麦粒(玉米)表面没有多余的水分时,加入石膏粉、过磷酸钙等,搅拌均匀,装瓶(用500克的罐头瓶或酒瓶X瓶加两层报纸,上覆1张耐高温的塑料,用橡皮圈(自行车废内胎剪成,每条约可剪 400个)灭菌时要求压力在 0.10 5 M pA,维持 2。J、时,灭菌时应注意排冷空气的时间,注意不要超压,灭菌时间一定要精确。

  2.2.2 先称取原料,将白糖、石膏粉、尿素、过磷酸钙等先溶化,制成母液,按大约所需水稀释,然后将棉籽壳拌湿,堆放2~3小时,搅拌加麸皮,拌匀,用手紧捏培养料,以指缝中有水外渗而不往下滴为适宜。装瓶时稍压实,加塞及高压的方法同上。

  2.2.3 接种培养@A菌的培养基出锅冷却至室温时进行接种,每只试管可接5~6瓶原种。培养条件同母种,一般经20~25天即可长满瓶子。注意:酒瓶培养到10~12天需摇瓶,然后再培养。优质原种的特征是菌丝洁白、整齐,瓶壁及表面布满菌丝,有菇香味。

  3、栽培种的制作

  3.1 培养基制备及配方 同制原种。

  3.2 接种培养 首先用75%酒精或3%来苏儿擦手及原种瓶外消毒,然后用消毒的接种铲(锄*翻松原种,在接种箱内(超净工作台上)的酒精灯火焰上方倒少许原种于灭菌的瓶料中,每瓶原种接20~25瓶,培养条件同原种。一般20~25天即可长满,长满后应立即播种。若暂时不用,可在10~14摄氏度下干燥保存,时间不超过10天;2~4 摄氏度时保存不超过2 0天。经低温保存的栽培种,在使用前将菌种放在常温下恢复1~2天。

  4、 小结 采用上述制种方法有如下优点

  4.1使用麦粒(玉米)菌种 制作方法简便、省工、菌种质量好,培养时摇瓶1~2次,菌丝与麦粒混合均匀,上下菌丝生长一致。

  4.2 用棉籽壳作原料成本低 每500克棉籽壳约可装5瓶,生长快,菌种质量好。与麦粒相比,操作略麻烦,在原种扩栽培种时,须借助接种铲(锄)才能完成。

  4.3 菌种生产周期短 一般从分离母种到栽培种制成只需50~55天。

  4.4 并且用种量省 一般1瓶栽培种可接种23~50厘米规格的5~6袋。

  4.5 发菌快 在栽培种袋中一般经过35~50天即可长满全袋。

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