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1. 培养基中加入乙醇
可能取杀菌的作用,也可能是为了选择耐酒精的微生物。
2. 培养基中加入乙醇的目的
细胞培养基中添加巯基乙醇需要过滤在某些细胞生长分裂的过程中,会向培养基中释放氧自由基。氧自由基积累到一定程度的时候,是有毒的,可以破坏细胞膜和细胞器膜,从而杀死细胞,使得细胞达不到很高的密度,从而干扰增殖实验的数据。
加入β-巯基乙醇的作用是作为一种强还原剂,中和掉细胞培养基中积累的氧自由基,这样可以使得细胞分裂到很高的密度而不死亡,从而便于进行细胞增殖实验。
3. 培养基中加入无水乙醇的目的
(1)西红柿的汁液为酸性,乳酸杆菌的最适合PH=5.2~5.6,所以明白了吧(2)凡是微生物培养,均不能遭受杂菌污染,所以在实验前可用无水酒精消毒(3)先调节PH,加入琼脂,融化后均匀搅拌倒入培养皿,冷却。
4. 乙醇在培养基中的作用
蛋白胨在培养基里起什么作用:
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蛋白胨属于氮源类,在培养基中主要提供氮; 灵芝接种 接种,可以在小型接种室里进行,也可以在大棚里进行,可以在大棚里临时搭建接种室。接种室大多是用塑料布围起来的一个封闭空间,建接种室的目的,也是防止杂菌侵入。 接种之前,先把消过毒的培养料集中放置在大棚里,然后用塑料布围起来,面积10到20平方米。 灵芝的菌种,可以在正规的菌种厂购买,要购买菌丝洁白,性状稳定的优质菌种。 进入临时接种室以后,将塑料布密封严实,防止含有杂菌的空气进入。 操作人员的双手,是最容易引起菌种和培养料污染的,要用75%的酒精进行擦拭消毒,在整个接种的过程中,需要经常消毒。 接种用的工具,如接种勾、镊子、接种勺等等,也要用75%的酒精进行擦拭,栽培种的外壁,在打开之前,也需要先用酒精消毒,把整个外壁擦拭一遍之后,再进行接种。 接种时,取出乒乓球大小的栽培种,打开培养料的袋口,放入袋口后,及时绑扎严实。为了防止接种不合格,可以在培养料的两头都接种。 在整个接种期间,参加接种的人员要有无菌意识,严禁吸烟、喝酒、大声说话、走动;接种要协调、熟练、轻缓、快速;各种工具不可乱放,要一直保持在无菌的容器里。 当接种的工作完成以后,工作人员退出接种室,用专用的食用菌熏蒸消毒剂,对培养料进一步消毒。 熏烟消毒,具有使用方便,点燃快速,扩散力强,全方位消毒的作用,灭菌有效率达99%以上。5. 培养基中加入乙醇可以灭菌吗
准备:小碗、温水、红糖水、白酒、醋引子、塑料膜、橡皮筋。
1、小碗中倒入适量的温水。
2、碗中倒入适量的白酒。
3、接着倒入适量的红糖水。
4、接下来加入一片醋引子即可。
5、下面把小碗用塑料膜密封好,保持二十天左右即可。完成食用醋菌。
注意事项:
酿造醋是以在制醋原料中加入醋酸菌或者利用天然的醋酸菌发酵后过滤而成。不同的原料,如五谷杂粮、水果等,不仅酿造出来的风味不同,且因通过酶、酵母、醋酸菌的作用,成分里除了醋酸外,还有其他挥发性有机酸类、糖类、脂类、氨基酸、有机酸,以及多种维生素、矿物质等,风味多样化。
口味甘醇,以及储存的越久,因醋酸菌与蛋白质所生的沉淀物会愈多,颜色会渐次变深,这是酿造醋有别于合成醋以及加工醋的最大差别之一,且因营养价值极高,可协助身体恢复健康的本质,借由醋与食物的自然搭配来补充营养,健全身体自身的机能。
6. 乙醇对培养基的影响
常见固体培养基的凝固剂一般是琼脂,它不是营养成分,只起固化作用。凝固剂的特性是不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是琼脂。琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖,绝大多数微生物都不能分解利用它。琼脂的熔点为96℃,凝固点为40℃,因此,在一般的培养条件下都呈固体状态,而且透明度强。琼脂这些特性,取代了早期使用的明胶而成为常用的凝固剂。
7. 液体培养基制备的注意事项
1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化。并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。
2、调节pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12~15毫升。每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜。
5、加棉塞
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。
1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。
(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度。
铺放培养基后放置15分钟左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培养基未长杂菌,即可用来培养微生物。
8. 培养基中加入乙醇溶液
ft培养基学名为硫乙醇酸盐流体培养基
其主要成分及作用原理:酪胨和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长;氯化钠维持均衡的渗透压;硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原电位,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性,同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用;少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散;刃天青是氧化还原指示剂,氧化状态呈粉红色,还原状态无色。 條萊垍頭
配至1000毫升ft培养液的总用量:垍頭條萊
酪胨(胰酶水解) 15.0g 萊垍頭條
L—胱氨酸 0.5g 萊垍頭條
葡萄糖 5.0g 垍頭條萊
酵母浸出粉 5.0g 萊垍頭條
氯化钠 2.5g 萊垍頭條
硫乙醇酸钠/硫乙醇酸 0.5g/0.3ml 萊垍頭條
刃天青 0.001g 萊垍頭條
琼脂 0.75g 萊垍頭條
配制方法:萊垍頭條
称取本品29.3g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,PH在7.1±0.2。分装试管,进行灭菌处理,121℃高压灭菌15min。 萊垍頭條
9. 培养基中加入乙醇的作用
培养基的种类有:
1)基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,最常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。
(2)营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。
(3)鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。
(4)选择培养基:在培养基中加入抑制剂,去抑制标本中的杂菌生长,有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂,其中的胆盐能抑制革兰阳性菌,枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌,因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。
(5)特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。
10. 培养基中加巯基乙醇
“巯基乙醇2-Me 对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清,有直接刺激细胞增殖作用。
2-Me的活性部分是硫氢基,其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,能诱导细胞的增殖,为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。
另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用,已广泛应用于杂交瘤技术,另外,也开始用于一些难以培养的细胞。”转自丁香园。那玩意的气味。。。永生难忘啊。。。
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