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1. 内切酶作用底物有何结构特点
葡萄糖苷酶是糖苷水解酶大家族中的一大类酶,主要功能为水解葡萄糖苷键,释放出葡萄糖作为产物。
葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一。β-葡萄糖苷酶可以参与纤维素的代谢以及多种生理生化途径,α-葡萄糖苷酶更是直接参与淀粉及糖原的代谢途径。这类酶的功能发生异常会导致出现代谢类的疾病,同时这类酶也是多种药物与抑制剂的作用靶点,用以调节人体内的糖化学代谢。
2. 酶的变构部位与底物结合部位不同
异性结合是指生物体内发生特异性免疫时 ,相应的抗原和抗体得结合叫做特异性结合,效应T细胞和靶细胞结和,催化该底物进行化学反应。
例如、配基-受体之间的相互辨别和选择性结合反应,即酶与底物接近时诱导酶蛋白变构,表现出酶对其底物具有严格的选择性。
这种现象可用诱导楔合学说来解释,并与其中构象最合适的一种底物结合:
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抗体和抗原接合产生沉淀。 生物特异性结合;有特异性的(抗体等)和相应的病毒或细胞结合,从立体结构角度上说就是相应的反应物之间构象的对应性。酶的特异性是指一种酶能在两种或多种不同底物之间作出辨别。通过X射线衍射分析证明,生物酶-底物,在此基础上酶与底物互补楔合进行反应、抗原-抗体,酶与底物结合时有显著的构象变化3. 酶的形状与底物结合有关吗
酶在催化反应前后其分子结构都不会发生改变,只是在催化反应进行中,结构才会改变。
酶分子就是蛋白质分子,与一般蛋白质分子不同的是,酶是一类能催化生物化学反应的特殊的蛋白质。
在酶分子内部,有一个由几个到十几个氨基酸分子以特殊结构组成的部位,这个部位叫酶的“活性中心”。有时,活性中心还有辅酶、辅基或金属离子参与形成。当活性中心与底物分子结合时,由于活性中心各个分子与底物分子之间的化学键、氢键、范德华力等作用,酶分子的结构有所改变,这种改变降低了底物分子发生化学变化的能量阈值,使化学反应能够在较低的能量水平上发生。
在反应完成后,活性中心与反应产物脱离,酶分子恢复原来的结构,以便与下一个底物分子结合。
4. 内切酶作用底物有何结构特点和作用
提质粒的目的是去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。
酶切的目的是对粘末端的DNA分子和载体分子进行切割,以获得相应的粘末端连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。
扩展资料:
1、提质粒原理
碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。
质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当以pH4.8的NaAc/KAc高盐缓冲液去调节其pH值至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,保存在溶液中,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
2、酶切基本原理
利用限制性内切酶对DNA上特定序列的识别,来确定切割位点并实现切割,从而获得所需的特定序列。
它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,然后从底物上解离。Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶,它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为独立的甲基化酶,它修饰同一识别序列。
5. 影响内切酶活性的因素有哪些
核酶的具体作用主要有: 1. 核苷酸转移作用。
2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。 3. 磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。 4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。 5. RNA内切反应,即RNA限制性内切酶作用。核酸内切酶可以催化水解多核苷酸内部的磷酸二酯键。有些核酸内切酶仅水解5′磷酸二酯键,把磷酸基团留在3′位置上,称为5′-内切酶;而有些仅水解3′-磷酸二酯键,把磷酸基团留在5′位置上,称为3′-内切酶。能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序,称为限制性核酸内切酶(restriction endonuclease,简称限制酶)。当外源DNA侵入细菌后,限制性内切酶可将其水解切成片段,从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达,而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰,不被水解,从而得到保护。限制性核酸内切酶可被分成三种类型。Ⅰ型和Ⅲ型限制酶水解DNA需要消耗ATP,全酶中的部分亚基有通过在特殊碱基上补加甲基基团对DNA进行化学修饰的活性。Ⅱ型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲基化或其它方式修饰DNA,能在所识别的特殊核苷酸顺序内或附近切割DNA
6. 底物与酶一般通过什么结合
因为底物浓度越大,与酶的活性中心结合的概率就越大,就越容易发生酶促反应。
7. 内切酶的性质和应用
限制性核酸内切酶的化学本质是蛋白质而不是核酶。 核酶是一种具有催化能力的RNA分子,其催化能力有限,不如蛋白质的催化能力高。
核酶的具体作用主要有:
1.核苷酸转移作用。
2. 水解反应,即磷酸二酯酶作用。
3.磷酸转移反应,类似磷酸转移酶作用。 4. 脱磷酸作用,即酸性磷酸酶作用。
5. RNA内切反应
8. 内切酶作用底物有何结构特点图片
1.化学本质都是蛋白质,
2.合成位置一般都在核糖体内.
3.作用:
解旋酶:就是作用DNA的,一般用在PCR技术中来打开一些DNA的二级结构.例如一些发卡结构,有利用DNA的复制.
DNA聚合酶:在PCR过程中,以DNA或cDNA为模板,以引物,dNTP,Mg2+等试剂为原料复制DNA所用到的一种不可或缺的酶.
RNA聚合酶和DNA聚合酶一样,只是他是用来复制RNA的.
逆转录酶:以RNA为模板,把RNA转变为单链的cDNA.以利于后续的DNA克隆以及文库构建.
限制酶:就是通常所说的限制性内切酶,不同酶的作用位点不一样切断DNA,一般用于分子克隆与载体构建等基因工程技术.
DNA边接酶:就是将限制性内切酶切断的DNA片断又重新连接成一条DNA.连接的DNA片断一定是同一个限制性内切酶切割产生同样粘端的片段,或者是不同酶切割产生平端的片段,但是这样的连接效率一般较低.
4.这些酶一般通过克隆,表达获得.存在不同生物体内.
9. 酶与底物结合都具有绝对特异性
酶活力(enzyme activity)也称酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高; 反之,速率越慢,酶的活力就越低。所以,测定酶的活力就是测定酶促转化速率。酶转化速率可以用单位时间内单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。酶活力的测定既可以通过定量测定酶反应的产物或底物数量随反应时间的变化,也可以通过定量测定酶反应底物中某一性质的变化,如黏度变化来测定。通常是在酶的最适pH 值和离子强度以及指定的温度下测定酶活力
10. 酶与底物结合时底物形状
酶是不参加反应的,首先要认识这一点。
酶的作用是降低反应的活化能,即与底物结合后,能使底物更容易反应。那么酶是如何行成中间底物的呢?我们知道酶是有专一性的,可以比喻酶是开门的钥匙,锁是底物,拿钥匙去开门这一结合就产生了中间产物。(我已多一年多不学生物,科学需要严谨,请多多参考课本)Www.tiaoWeiWang.coM调味品网行业招商批发平台,提供食品,干货,香辛料,火锅底料,食品添加剂,复合调味品,酱油,醋,糖,香油,鸡精,调料,味精,番茄酱,芝麻酱等市场行情。