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1. 试剂缓冲液有什么用
PBS缓冲液,是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。
如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二价阳离子。
2. 离子对试剂缓冲液
pbs缓冲液带电:
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PBS(phosphate buffered solution)即磷酸盐缓冲液,能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等,pH为 7.4,与人体血液等渗,主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)
配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
氯化钾(KCl)0.2g,
加去离子水约800mL
充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后室温保存。 PBS缓冲液(pH7.2~7.4):
NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。
1x PBS缓冲液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.01M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。
3. 试剂缓冲液有什么用处
一般不开封的状态下,保质期为1年(实际以实际包装规定为准)。一旦开封使用,由于空气中各种霉菌以及二氧化碳等物质的作用,较易变质。建议缓冲液开封后,放入冰箱冷藏保存,建议放置不超过一个月。
建议PH缓冲液开封后,倒出部分溶液使用,使用后溶液建议倒入废液桶,不再重复使用。瓶中剩余的溶液密封、避光、冷藏,可以保存半年(如密闭不完全等则会导致保质期变短)。
4. 试剂缓冲液有什么用途
TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液 Tris缓冲盐水(TBS):10mmol/L,Tris含0.9%NaCl,用1N HC1调pH至7.4
5. 缓冲试剂是用来做什么的
可用于:
(1)作为电泳中的运行缓冲液和用于色谱中的蛋白质纯化;
(2)配制成多种琼脂培养基,用于细菌,酵母和哺乳动物细胞的培养。但是,高于20mM的浓度不推荐用于哺乳动物细胞;
(3)可用作大肠杆菌细胞的裂解缓冲液;
(4)作为凝胶过滤色谱中的洗脱液;
(5)应用于Northern杂交,作为RNA的分离和转膜时的缓冲液;
(6)适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;
(7)用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究。
MOPS注意事项:
1. MOPS生物缓冲试剂是一种两性离子缓冲液。倘若MOPS每次的使用剂量非常小的话,一般进行恰当的分装之后再合理的使用。
2. 通常生物缓冲液遇见光线后非常容易使液体颜色变成黄色的,淡黄色的完全可以使用。如果颜色过深后就不应该再进行使用了。
3. MOPS生物缓冲试剂的使用过程需要特别地注意,生产安全和人员健康一定不能马虎,所以实验服要穿好,并且戴一次性手套来操作。一旦发生溶液飞溅到眼睛的情况,或者稍微有点接触的,则必须马上使用大量的清水冲洗,并且马上到医就诊。
6. 实验中缓冲液的作用是什么
在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。
磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH),可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉淀,在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的缓冲系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCl系统,而TE缓冲液中的EDTA更能稳定 。
7. 化学缓冲液的作用
因为它有一个缓冲期,所以叫缓冲溶液。
使用PH计时用中性(6.86)定位,再根据被测样品的酸碱性选择4.01或9.18的标定。之所以用标准溶液定位,原因是我们用已知pH值的缓冲溶液将pH计校正到该pH下,才会使测定的样品准确度高。
例如在校准前,我们为了测试,可拿一个准确pH的缓冲溶液当作样品来测定,pH计显示的值较准确值是有偏差的,为了使偏差消除,所以才校准。
常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有:
1、弱酸和它的盐(如HAc---NaAc)
2、弱碱和它的盐(NH₃·H₂O---NH₄Cl)
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如NaH₂PO4---Na₂HPO₄)的水溶液组成。
扩展资料:
生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PKa值相同。酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不变。
8. 缓冲试剂有哪些
ph1缓冲溶液的配制
对于一般的pH测量,可使用成套的pH缓冲试剂可配制250ml,配制溶液时,应使用去离子水,并预先煮沸15~30分钟,以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中,用适量去离子水使之溶解,并冲洗包装袋,再倒入250ml容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。
9. 缓冲液有何应用
①缓冲溶液作用原理和pH值 当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,
这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。 由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。
当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本上被A-离子消耗: 所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。
②缓冲溶液的缓冲能力 在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。 缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。
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